《乳及乳制品中牛羊源性成分定性检测方法 实时荧光PCR法》和《乳及乳制品中牛乳酪蛋白成分定性检测 毛细管凝胶电泳法》团体标准问答

 

　　《食品安全法》中明确规定，禁止生产经营“掺杂掺假”食品，由于山羊乳、绵羊乳、牦牛乳、水牛乳等特色乳的数量和日产量比较小，价格偏高，在经济利益的驱动下，有些不法商贩和企业在特色乳中掺入牛乳以降低成本，牟取暴利，且各种乳成分接近，性质相似，在特色乳中掺入一定量的牛乳很难从感官及常规指标上检测出来。这不仅仅涉及经济、营养价值和食品安全等问题，更直接影响着消费者的权益，而且容易引起过敏等健康风险，同时也扰乱了市场的秩序，制约了羊乳等特色乳产业的的正常发展。

 

　　另外，为加强对婴幼儿配方乳粉等特殊食品的监管力度，2016年6月，国家食品药品监督管理总局颁布了《婴幼儿配方乳粉产品配方注册管理办法》，规定“产品名称中有动物性来源的，应当根据产品配方在配料表中如实标明使用的生乳、乳粉、乳清（蛋白）粉等乳制品原料的动物性来源。使用的乳制品原料有两种以上动物性来源时，应当标明各种动物性来源原料所占比例”。

 

　　为保障羊乳等特色乳及其产品品质，确保生产厂家及消费者的利益，亟待建立简便、快速、准确的检测乳及乳制品中乳源的技术体系，特制定这两个标准，并于2020年由中国营养保健食品协会立项。

 

 

　　本标准是专门针对乳及乳制品建立的，规定了从样品前处理、DNA提取方法、乳源物种检测以及结果判定等方面的标准操作流程，适用于乳及其制品中牛（家牛、牦牛和水牛）、羊（山羊和绵羊），以及家牛、牦牛、水牛、山羊、绵羊源性成分的定性检测，适用的产品类别包括液态乳（巴氏杀菌乳、高温杀菌乳、调制乳、灭菌乳、发酵乳），乳粉（全脂乳粉、脱脂乳粉、部分脱脂乳粉、调制乳粉、乳清粉），婴幼儿配方乳粉等。

 

　　目前现有的标准仅规定了牛羊源性成分检测方法，涉及样品前处理、DNA提取方法不适应于乳及乳制品，且本标准的物种涉及牛（家牛、牦牛和水牛）、羊（山羊和绵羊），以及家牛、牦牛、水牛、山羊、绵羊7种乳源物种成分实时荧光PCR法，适用范围和应用领域更广。

 

　　同时考虑到婴幼儿配方乳粉中乳配料可能引入牛源的问题，因此本标准在建立牛（家牛、牦牛和水牛）以及家牛检测方法时，既要考虑方法的特异性、灵敏度，同时还需兼顾不能检出由于乳配料可能引入牛源成分的问题，因此在标准中规定了待检样品DNA浓度、上样量、判定阈值等，为避免误判奠定了基础。

 

 

　　针对羊乳及乳制品检测时，首先采用《乳及乳制品中牛（家牛、牦牛和水牛）和羊（山羊和绵羊）源性成分定性检测方法实时荧光PCR法》作为初筛方法，采用本标准建立的牛（牛、水牛和牦牛）或家牛乳源成分对样品中牛源性成分进行检测。若未检出牛基因成分，则判定羊乳制品中不含有牛乳成分；如检出牛基因成分，则进一步采用标准《乳及乳制品中牛乳酪蛋白成分定性检测毛细管凝胶电泳法》确证产品的蛋白成分来源，判定牛基因检测阳性的样品是否含有来源于牛乳酪蛋白，进而对样品的真实性进行判定，两种方法联合检测解决了以往乳制品检测中因配料复杂、乳源判别困难的瓶颈问题，技术路线图如下图1所示：

 

 

　　本标准规定了乳及其制品中牛（家牛、牦牛和水牛）、羊（山羊和绵羊）源成分，以及家牛、牦牛、水牛、山羊、绵羊单一乳源成分的实时荧光PCR定性检测方法，在实际检测的过程中，可根据样品标签的乳源标识选择相应的引物探针，可参考下表列举的可能性产品例子，包括但不限于此表：

 

　　表1乳及乳制品中乳源及掺杂成分检测举例